Precise genomic integration of large DNA fragments by donor-directed annealing using prime editing.
期刊Nature biotechnology
发表日期2026-08-28
影响因子IF 44.5
涉及基因未提及
编辑类型未使用基因修饰模型
实验用途开发prime assembly工具实现大片段DNA的精确基因组整合
中文研究总结
本研究开发了一种名为Prime Assembly（PA）的可编程基因替换工具，该技术利用prime editors在基因组和供体DNA上产生一对或两对3'-flap，使这些3'-flap像Gibson组装一样精确退火，从而实现兆碱基级别的基因组切除和千碱基级别的供体DNA插入。PA接受1.0-6.5 kb的质粒或线性双链DNA作为供体。在HEK293T细胞中，用2.9 kb供体DNA替换内源性序列的效率高达57.8%，整合准确性超过90%。此外，PA还能在原代人类T细胞中进行位点特异性CAR整合，效率达28.1%。通过 hydrodynamic injection 将携带GFP的PA递送至小鼠体内，在GFP阳性肝细胞中测得平均整合效率为4.3%。该技术为大规模基因组片段的精准编辑提供了新的强有力工具。
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